賽默飛世爾科技Varioskan LUX多功能酶標儀是生命科學研究和質量檢測領域的高性能核心檢測設備 。為確保其發(fā)揮性能 并獲得穩(wěn)定可靠 的數(shù)據(jù)結果，用戶需重點關注以下操作要點：

樣本制備與耗材選擇：

避免氣泡干擾： 加樣時務必輕柔，避免在孔內產(chǎn)生氣泡。氣泡會顯著干擾光路，尤其在吸光度(UV-Vis) 和熒光強度(FI) 檢測中導致讀數(shù)異常偏高或不穩(wěn)。檢測前可短暫離心酶標板或使用無塵棉簽小心去除氣泡。

選用高品質耗材： 使用光學性能優(yōu)異 、板間均一性好 的標準96孔板或384孔板。劣質板可能導致孔間差異（CV值高）、背景熒光高或化學發(fā)光信號弱等問題，影響檢測靈敏度 和數(shù)據(jù)精度 。對于熒光偏振(FP) 和時間分辨熒光(TRF) 等對背景要求的應用，務必選用專用低背景黑色酶標板。

樣本澄清度： 對于吸光度 檢測，確保樣本溶液澄清，無沉淀或懸浮顆粒，避免光散射造成假陽性高信號。

儀器放置與環(huán)境控制：

穩(wěn)定工作臺面： 將儀器放置在水平、穩(wěn)固、無震動的實驗臺上，避免因周圍設備（如離心機、搖床）運行引起的震動干擾讀數(shù)穩(wěn)定性。

環(huán)境光控制： 進行化學發(fā)光(Lum) 、生物發(fā)光(BL) 以及微弱的熒光 檢測時，需在暗室或使用儀器配套的遮光板進行操作，避免環(huán)境雜散光干擾導致本底升高或信號被掩蓋，確保高靈敏度 檢測的實現(xiàn)。

溫濕度適宜： 確保儀器運行環(huán)境符合要求（通常為15-30℃，相對濕度<80%），避免特殊溫濕度影響光學系統(tǒng)性能、電子元件穩(wěn)定性及樣本艙溫控精度 。

實驗參數(shù)優(yōu)化設置：

波長選擇精準： 根據(jù)實驗方案，在SkanIt軟件中精確設置激發(fā)光(Ex )和發(fā)射光(Em )波長。充分利用Varioskan LUX的雙光柵單色器 優(yōu)勢，針對不同應用選擇最佳帶寬（如1nm用于高分辨率光譜掃描，更寬帶寬用于提高光通量及信噪比）。確保所選波長與實驗所用熒光染料或生色團的特性匹配。

增益/靈敏度優(yōu)化： 對于化學發(fā)光 和低信號熒光 檢測，需合理設置光電倍增管(PMT )增益。增益過低可能導致信號太弱無法檢出；增益過高則可能使強信號飽和（超出寬動態(tài)范圍 上限）或引入過多背景噪聲?？上葘Υ硇詷颖具M行預實驗以確定最佳增益值。

溫控設定與平衡： 若實驗需要樣本艙控溫（如酶動力學實驗、細胞實驗），請?zhí)崆霸O定目標溫度（范圍：室溫+5℃至65℃）并預留足夠時間讓溫控模塊達到設定溫度且穩(wěn)定（軟件通常會有溫度達到提示）。避免在溫度未穩(wěn)定時進行讀數(shù)。注意檢查孔板蓋是否蓋好，防止孔間溫度不均一。

讀數(shù)時間點/動力學設置： 對于化學發(fā)光 等信號衰減較快的檢測模式，或需要監(jiān)測反應進程的動力學實驗，務必在軟件中精確設置讀數(shù)延時、間隔和總持續(xù)時間，確保捕捉到關鍵信號。

儀器維護與校準：

保持清潔： 定期用無塵布及專用光學清潔劑（或無水乙醇）清潔儀器外殼、樣本艙底部光學窗口（進光口）及濾光片輪/光柵窗口（操作前務必關機并查閱手冊）。樣本溢出務必立即完整清潔，防止污染光路或腐蝕部件。注意：切勿讓液體流入儀器內部！

光源維護： 遵循手冊建議的氙燈使用時長和保養(yǎng)周期。氙燈老化會導致光源強度下降，影響所有光學模式的靈敏度 。軟件通常有燈泡計時器和預警提示。更換光源需由專業(yè)工程師操作或嚴格遵循流程。

定期性能驗證： 使用標準參比板（如吸光度標準板、熒光標準板、化學發(fā)光參比板）定期進行儀器性能驗證（如靈敏度、線性度、孔間均一性），確保儀器狀態(tài)符合預期。賽默飛提供專用的Validation Pack。

專業(yè)維護與服務： 按計劃進行預防性維護(PM)，由賽默飛認證工程師進行關鍵部件檢查、光路校準、軟件升級等，保障儀器長期處于最佳性能狀態(tài) 。

Varioskan LUX 核心工作原理：精密光路賦能多模式檢測

Varioskan LUX 作為一款先進的多功能酶標儀，其核心工作原理基于精密的光學檢測系統(tǒng) 、高性能信號處理 與智能溫控模塊 的協(xié)同工作：

光源系統(tǒng)：

采用高亮度、寬光譜覆蓋的氙閃光燈 作為主要光源。氙燈在紫外至近紅外區(qū)域均有強輸出，為吸光度 、熒光激發(fā)(Ex) 提供了穩(wěn)定、瞬態(tài)的高強度光脈沖，有利于提高信噪比和減少光漂白。

光路系統(tǒng)（核心）：

激發(fā)單色器： 位于光源后，用于從氙燈寬譜光中選擇出實驗所需的特定波長(Ex λ)的激發(fā)光。光柵通過精密轉動選擇波長，最小帶寬可達1nm ，提供波長分辨率和純度，有效降低雜散光背景。

發(fā)射單色器： 位于樣品和檢測器之間，用于從樣品發(fā)出的混合光（熒光/化學發(fā)光/透過光）中選擇出特定的發(fā)射波長(Em λ)或檢測波長(Abs λ)。

雙光柵單色器技術： 這是Varioskan LUX的核心優(yōu)勢之一。儀器配備兩個獨立的全息光柵單色器 ：

光路設計： 激發(fā)光經(jīng)Ex單色器選波后，通過反射鏡系統(tǒng)引導，從下方垂直照射到微孔板樣品孔底部。樣品受到激發(fā)后產(chǎn)生的信號（透射光、熒光、化學發(fā)光）向上發(fā)射，再經(jīng)光路系統(tǒng)收集，通過Em單色器選波（或直接進入檢測器），最終到達**光電倍增管(PMT)**檢測器。

檢測器與信號處理：

高性能PMT檢測器： 采用高靈敏度、低噪聲的光電倍增管(PMT)作為核心檢測元件。PMT能高效地將微弱的光子信號轉化為可測量的電信號，并進行多級放大。這是實現(xiàn) 超高靈敏度 （尤其在化學發(fā)光和弱熒光檢測中）和寬廣動態(tài)范圍 （可達8個數(shù)量級）的關鍵。

信號采集與轉換： PMT產(chǎn)生的微弱電流信號被高速、高精度的電子電路采集并轉換為數(shù)字信號。儀器的電子系統(tǒng)具有強大的信號處理能力，能有效抑制噪聲，保證數(shù)據(jù)的高保真度 和穩(wěn)定性 。

多模式檢測原理：

吸光度(Absorbance - UV-Vis)： 測量特定波長(Abs λ)的光穿過樣品溶液后的強度衰減（被吸收程度）。根據(jù)朗伯-比爾定律，吸光度值與溶液中的待測物濃度成正比。激發(fā)光和檢測光為同一波長（或窄帶）。

熒光強度(Fluorescence Intensity - FI)： 特定激發(fā)波長(Ex λ)的光激發(fā)樣品中的熒光物質，使其躍遷至激發(fā)態(tài)，隨后發(fā)射出更長波長(Em λ)的熒光。儀器測量的是在Em λ處的熒光強度。信號強度與熒光物質濃度相關。

時間分辨熒光(Time-Resolved Fluorescence - TRF)： 利用某些鑭系元素螯合物長壽命熒光的特點。在短脈沖激發(fā)后，延遲一段時間（通常幾十至幾百微秒），待短壽命的背景熒光和散射光完整衰減后，再開啟檢測窗口測量長壽命的特異性熒光(Em λ)信號。此技術極大降低了背景干擾，顯著提高信噪比 和靈敏度 。

熒光偏振(Fluorescence Polarization - FP)： 使用偏振器使激發(fā)光(Ex λ)成為單一偏振面。熒光分子在被偏振光激發(fā)后發(fā)射的熒光也具有一定的偏振性。大分子（結合態(tài)）旋轉慢，發(fā)射光偏振度高；小分子（游離態(tài)）旋轉快，偏振度低。儀器通過檢測特定Em λ處兩個垂直偏振方向上的熒光強度比來計算偏振度或各向異性，用于研究分子結合、相互作用等。

化學發(fā)光(Chemiluminescence - Lum) / 生物發(fā)光(Bioluminescence - BL)： 測量化學反應（化學發(fā)光）或生物酶促反應（生物發(fā)光）自身產(chǎn)生的光信號(Lum)。此過程無需激發(fā)光源，直接在特定波長范圍內（通常全波長或特定波段）檢測樣品發(fā)射的光子強度。Varioskan LUX的高靈敏度PMT和低噪聲電路使其在此模式下表現(xiàn)尤為出色。

溫控系統(tǒng)：

儀器集成精確的樣本艙溫度控制系統(tǒng) 。采用熱電制冷（Peltier）技術或結合加熱/制冷模塊，可在室溫+5℃至65℃ 范圍內精確控制并維持整個微孔板區(qū)域的溫度，溫度均一性好。這對于需要精確溫度控制的酶動力學研究、細胞培養(yǎng)監(jiān)測、結合反應等實驗至關重要，確保反應條件一致，結果可靠重現(xiàn) 。

選擇賽默飛Varioskan LUX，選擇可靠與高效

通過理解其精密的光學原理 （雙光柵單色器、高性能PMT）和穩(wěn)定的溫控系統(tǒng) ，并嚴格遵守關鍵操作注意事項（規(guī)范樣本制備、優(yōu)化參數(shù)、環(huán)境控制、定期維護），用戶能夠很大程度發(fā)揮賽默飛Varioskan LUX多功能酶標儀的性能 。其多模式集成能力 （吸光、熒光、化學發(fā)光、TRF、FP）、靈敏度 、寬動態(tài)范圍 、高通量效率 及智能的SkanIt軟件 ，使其成為提升實驗室研究效率和檢測質量的有力保障。